DYCP-40C セミドライブロッティングシステムは、ポリアクリルアミドゲル内のタンパク質をニトロセルロース膜、ナイロン膜、PVDF 膜などの膜に転写するために電気泳動電源と併用します。セミドライブロッティングは、イオンリザーバーとして機能する緩衝液に浸した濾紙シートの間にゲルと膜を挟んだ水平配置のグラファイトプレート電極を使用して実行されます。電気泳動転写中、負に帯電した分子はゲルから出て正電極に向かって移動し、そこで膜上に堆積します。プレート電極は、ゲルと濾紙のスタックによってのみ分離されており、ゲル全体に高い電界強度 (V/cm) を提供し、非常に効率的かつ迅速な転写を実行します。小型の DYCP – 40C 電気泳動セルの転写面は 150 × 150 (mm) で、DYCZ-24DN および DYCZ-24EN 電気泳動セルからのゲルを含む標準ゲルの転写に適しています。
このセミドライトランスブロット装置の操作について詳しく学びましょう。
DYCP-40Cを操作するための材料、器具
電気泳動電源 DYY-6C、セミドライトランスブロット装置 DYCP-40C、緩衝液、緩衝液用容器。等
操作手順
1. ゲルとガラスプレートを転写緩衝液に入れます。
2. ゲルのサイズを測定します
3.ゲルのサイズに応じて濾紙を 3 枚準備します。濾紙のサイズはゲルのサイズより少し大きい必要があります。ここではワットマン濾紙を使用します。
4.3枚の濾紙を緩衝液にゆっくりと入れ、気泡が入らないように濾紙を完全に緩衝液に浸します。
5.ゲルと濾紙のサイズに応じてニトロセルロース膜を準備してカットします。ニトロセルロース膜のサイズはゲルと濾紙のサイズより大きくなければなりません。
6.ニトロセルロース膜を緩衝液に入れます。
7。3 枚の濾紙を取り出し、メンブレンから緩衝液が滴らなくなるまで余分な緩衝液を落とします。次に濾紙をDYCP-40Cの底に置きます。
8.ガラスプレートからゲルを取り出し、スタッキングゲルを丁寧に洗浄し、ゲルを緩衝液に入れます。
9.ゲルを濾紙の上に置き、気泡を避けるためにゲルの一端から始めます。
10.適切なツールを使用して、ゲルと濾紙の間の気泡を取り除きます。
11.ゲル上のニトロセルロース膜を、粗い面をゲルに向けて覆います。次に、適切なツールを使用してメンブレンとゲルの間の気泡を取り除きます。膜の上に3枚の濾紙を置きます。ろ紙と膜の間の気泡を取り除くために適切なツールを使用する必要があります。
12.蓋を覆い、電気泳動の実行パラメータ、定電流 80mA を設定します。
13.電気泳動が完了します。次のような結果が得られます。
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投稿時間: 2023 年 4 月 4 日