PCR におけるサーマル サイクリング プロセスとは何ですか?

ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) は、特定の DNA 断片を増幅するために使用される分子生物学の手法です。これは、生物体外での DNA 複製の特殊な形式と考えることができます。 PCR の主な特徴は、微量の DNA を大幅に増加できることです。

ポリメラーゼ連鎖反応サイクルの概要

ビオニンジャからの画像

PCR におけるサーマル サイクリング プロセスとは何ですか?

PCR は 3 つの基本的なステップで構成されます。

1. テンプレート DNA の変性: テンプレート DNA を約 93°C で一定時間加熱すると、二本鎖 DNA が一本鎖に分離され、次の反応サイクルでのプライマー結合の準備が整います。

2. 鋳型 DNA とプライマーのアニーリング: 変性後、温度を約 55°C まで下げ、プライマーを一本鎖鋳型 DNA 上の相補配列に結合させます。

3. プライマーの伸長: 72°C で、DNA テンプレートとプライマーの複合体は、DNA ポリメラーゼ (Taq DNA ポリメラーゼなど) の助けを借りて伸長を受け、基質として dNTP を使用して、テンプレート DNA に基づいて新しい相補鎖を合成します。

北京LIUYI PCR装置

変性、アニーリング、および伸長のプロセスを繰り返すことによって、より多くの「半保存的複製鎖」が生成され、後続のサイクルの鋳型として機能することができます。各サイクルには約 2 ～ 4 分かかり、標的遺伝子は 2 ～ 3 時間以内に何百万回も増幅されます。

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