アガロースゲルの調製で難しいことはありますか?フォローアップしましょうラボの技術者がゲルを準備中.
アガロースゲルの調製プロセスには次の手順が含まれます。
アガロース粉末の計量
実験に必要な濃度に応じて、必要な量のアガロース粉末を秤量します。一般的なアガロース濃度は 0.5% ～ 3% の範囲です。より高い濃度はより小さな DNA 分子の分離に使用され、より低い濃度はより大きな分子の分離に使用されます。
緩衝液の準備
アガロース粉末を 1× TAE または 1× TBE などの適切な電気泳動バッファーに追加します。バッファーの量は、実験に必要なゲルの量と一致する必要があります。
アガロースの溶解
アガロースと緩衝液の混合物を、アガロースが完全に溶解するまで加熱します。これは電子レンジまたはホットプレートを使用して行うことができます。沸騰を防ぐために溶液を断続的にかき混ぜます。アガロース溶液は透明になり、目に見える粒子はなくなります。
アガロース溶液の冷却
加熱したアガロース溶液を約 50 ～ 60°C まで冷却します。早期固化を防ぐために、冷却プロセス中に溶液を撹拌します。
核酸染色の追加 (オプション)
ゲル内の DNA または RNA を視覚化したい場合は、この段階で GelRed やエチジウムブロマイドなどの核酸染色剤を追加できます。これらの汚れを扱うときは、有毒である可能性があるため、手袋を着用し、注意してください。
ジェルをキャストする
冷却したアガロース溶液を準備した電気泳動ゲル型に注ぎます。コームを挿入してサンプルウェルを作成し、コームがしっかりと固定され、溶液が型内に均一に分布していることを確認します。
ゲル固化
ゲルが室温で固まるまで待ちます。ゲルの濃度と厚さに応じて、通常 20 ～ 30 分かかります。
Rコームを取り除く
ゲルが完全に固まったら、慎重にコームを取り外してサンプルウェルを露出させます。ゲルをモールドと一緒に電気泳動チャンバーに置き、適切な量の電気泳動バッファーで覆い、ゲルが完全に浸っていることを確認します。
電気泳動の準備
ゲルの準備ができたら、サンプルをウェルにロードし、電気泳動実験を続行します。.
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投稿日時: 2024 年 10 月 15 日