電気泳動用のアガロースゲルの準備

電気泳動用アガロースゲルの調製

注: 必ず使い捨て手袋を着用してください。

ステップバイステップの説明

アガロース粉末の計量:u秤量紙と電子天秤を使用して、アガロース粉末 0.3 g を測定します (30 ml システムに基づく)。

TBST バッファーの準備:p100ml 三角フラスコに 30ml の 1x TBST バッファーを調製します。

溶解アガロース粉末:pアガロース粉末をTBSTバッファーに加え、よく振ります。それらを入れてください電子レンジに入れ、完全に溶けるまで加熱します(通常はアルミホイルで覆い、50秒間)。

冷却とヌクレアーゼの添加:u手袋をして電子レンジから混合物を取り出し、温まる (約 60°C) まで冷水で少し冷やします。振とうしながらヌクレアーゼ (Eb 代替品) 2µl を加えて完全に混合します。

ゲル型の準備:

  • C傾いて乾燥させますゲルトレイとゲル注入装置電気泳動槽の様子。
  •  Pジェルをひもで結ぶトレイを内槽に入れ、定位置にコームを差し込みます。
  • 約65℃に冷却したアガロースゲル溶液を混合し、慎重に注ぎます。ゲルトレイゲル注入装置、ガラス板上に均一なゲル層が形成されるまでゆっくりと広げます。
  • ゲルが完全に固まるまで室温で放置します。
  • コームを垂直にゆっくりと外し、テープを剥がします。
  • ジェルを置きますトレイ電気泳動槽に投入します。

重要: 櫛の歯の部分に気泡がないことを確認してください。液体の表面は波紋がなく滑らかである必要があります。

ジェルを実行する

ゲルのロード

ゲルが固まったら、電気泳動タンクに入れ、ゲルが浸るまで泳動バッファーを注ぎます。

サンプルの準備

  • 冷蔵庫からマーカーとローディングバッファーを取り出します。
  • 6µl のローディングバッファーをサンプルに加え、よく混合します。
  • マイクロピペットを使用して、サンプルをゲルの大きなウェルにゆっくりとロードします(ゲルに穴を開けないように注意し、気泡を避けるために全量を分注しないように注意してください)。
  • マーカーをいずれかの小さなウェルにロードします (位置を覚えておいてください)。

電気泳動の開始

  • 電気泳動タンクに蓋をし、ゲルをロードしたらすぐに電気泳動を開始します。
  • 電圧を60〜100Vに設定します。サンプルは負極 (黒) から正極 (赤) に移動します。
  • 電圧が高くなると、アガロースゲルの有効分離範囲が短くなります。
  • ブロモフェノールブルー色素がゲルプレートの下端から約 1cm に達した時点で電気泳動を停止します。

結果の観察

バンドを分離した後、電気泳動を停止し、ゲルを取り出し、直接検出して撮影します。

ゲルイメージングシステムを使用してバンドを写真撮影および観察します(マーカーまたはサンプルのバンドがあるかどうかを確認します)。

ゲルバンドマップを取得したら、マーカーを見つけます。マーカーを基準に対象バンドを決定!

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北京 Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) は 50 年以上にわたって電気泳動製品を製造してきました。ここでは当社の水平型電気泳動システムを紹介します。アガロースゲル電気泳動。選ぶ横型電気泳動システムバイオテクノロジー産業の研究に役立つゲル電気泳動実験を北京liuyiから提供します。

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投稿時刻: 2024 年 8 月 9 日