アセテートセルロース膜の前処理
膜の切断:
分離されたサンプルの量に基づいて、酢酸セルロース膜を特定のサイズ (通常は 2.5cmx11cm または 7.8cmx15cm) に切断します。
サンプル アプリケーション行のマーキング:
- メンブレンの非光沢側に、鉛筆でサンプル塗布線を軽くマークします。
- 塗布ラインの位置は、メンブレンの一端から 2 ～ 3 cm、または場合によっては中心線近くから選択できます。
- アプリケーションラインの位置は通常、予備的な電気泳動実験に基づいて決定されます。
電極緩衝液に浸す：
- 浅い皿または培養皿に電極緩衝液を注ぎます。
- 非光沢面を下にして、メンブレンを電極緩衝液の表面に注意深く浮かせます。
- メンブレンの底部が電極緩衝液を吸収すると、完全に沈むまで徐々に沈みます。
余分な液体の除去と吸収:
- メンブレンが電極緩衝液に浸透したら、鈍い鉗子を使用して注意深くメンブレンを取り外します。
- 2 層のろ紙の間にメンブレンを挟んで過剰な電極緩衝液を吸収し、過度の乾燥を避けます。
- 過度の乾燥を示す白い不透明な領域がメンブレン上に現れた場合は、メンブレンを電極緩衝液に再度浸し、濾紙で適切な程度まで吸収させます。
サンプル申請プロセス
サンプル アプリケーション ラインの選択と操作:
メンブレンの非光沢側のサンプル塗布ラインに沿ってサンプルを塗布します。通常は点状ではなく線状パターンで塗布します。
定性分析サンプル アプリケーション:
- 定性分析サンプルの塗布にはキャピラリーチューブ（直径0.5～1.0mm）やモールドを使用します。
- 定性分析中は、サンプルを浸し、サンプル塗布ラインに沿って「スタンプ」します。
定量分析サンプル アプリケーション:
- 定量分析サンプルの塗布にはマイクロリットルシリンジを使用します。
- キャピラリーチューブやマイクロリッターシリンジを使用する場合は、サンプル塗布ラインに沿って上下左右にスムーズに動かして、所定量のサンプルを塗布します。
横断抽出ラインの寸法の制御:
- 各サンプルを膜に適用した後のサンプルラインの長さは通常 1.5cm、幅は通常 4mm を超えません。
- サンプルライン間の距離、およびサンプルラインとメンブレンの長辺の間の距離は、通常 3 ～ 5 mm です。
サンプル量の調整:
適用されるサンプルの量は、サンプル濃度、染色、分析方法などの要因によって大きく異なります。
定量分析時のサンプル量:
定量分析の場合、サンプル塗布ラインの各センチメートルに塗布されるサンプル量は通常 0.1 ～ 0.5 μl で、これは 5 ～ 1000 μg のタンパク質サンプルの量に相当します。
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このシンプルで経済的な電気泳動法に興味がある場合は、当社の実験者が提供するヘモグロビン電気泳動のプロトコルとガイドラインについては、次の記事を参照してください。
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投稿時刻: 2024 年 1 月 30 日