ゲル電気泳動は、分子生物学における DNA 分析に使用される主要な方法の 1 つです。この方法では、サイズや形状に基づいて DNA フラグメントをゲルを通して分離します。しかし、電気泳動実験中に、アガロースゲル上のバンドが汚れていたり、ゲル上にバンドがないなどのエラーに遭遇したことはありますか?これらのエラーの原因は何でしょうか?
弊社の技術者がいくつかのトラブルシューティングをここにまとめましたので、ご参照ください。
1. アガロースゲル上のスミアバンド
●DNAが分解されていました。ヌクレアーゼの汚染を避けてください。
● 電気泳動バッファーが新鮮ではありません。電気泳動バッファーを繰り返し使用すると、イオン強度が低下し、pH 値が上昇するため、バッファー容量が弱くなり、電気泳動効果に影響します。電気泳動バッファーは頻繁に交換することをお勧めします。
● 不適切な電気泳動条件が使用された。電気泳動中は電圧が 20 V/cm を超えないようにして、温度を 30℃ 未満に維持してください。巨大 DNA 鎖電気泳動の場合、温度は 15℃ 未満である必要があります。電気泳動バッファーに十分なバッファー容量があることを確認してください。
● ゲルにロードされた DNA が多すぎます。 DNAの量を減らします。
● DNA 内の塩分が多すぎる。エタノール沈殿を使用して、過剰な塩を事前に除去します。
● DNA がタンパク質に汚染されていた。フェノール抽出を使用してタンパク質を事前に除去します。
● DNA が変性した。電気泳動の前に加熱しないでください。 20 mM NaCl を含むバッファーで DNA を希釈します。
2. 異常 DNA バンドの移動
● λHind III フラグメントの COS 部位の再生。電気泳動の前に DNA を 65℃ で 5 分間加熱し、その後氷上で 5 分間冷却します。
● 不適切な電気泳動条件が使用された。電気泳動中は電圧が 20 V/cm を超えないようにし、温度を 30℃ 未満に維持してください。電気泳動バッファーに十分なバッファー容量があることを確認してください。
● DNA が変性した。電気泳動の前に加熱しないでください。 20 mM NaCl を含むバッファーで DNA を希釈します。
3. アガロースゲル上に DNA バンドが薄い、または存在しない
● ゲルにロードされた DNA の量または濃度が不十分でした。 DNAの量を増やす。ポリアクリルアミドゲル電気泳動はアガロース電気泳動よりわずかに感度が高く、サンプルの負荷を適切に減らすことができます。
●DNAが分解されていた。ヌクレアーゼの汚染を避けてください。
● DNA を電気泳動してゲルから分離しました。ゲルの電気泳動時間を短くするか、より低い電圧を使用するか、より高いパーセントのゲルを使用してください。
● 臭化エチジウム染色 DNA の可視化に不適切な紫外光源が使用されました。感度を高めるには、短波長 (254 nm) の W ライトを使用します。
4. DNA バンドが欠落している
●小さいサイズの DNA を電気泳動してゲルから分離しました。ゲルの電気泳動時間を短くするか、より低い電圧を使用するか、より高いパーセントのゲルを使用してください。
● 類似した分子の DNA バンドを区別するのが困難。電気泳動時間を長くして濃度を確認してください使用するゲルの割合が正確であることを確認するために、ゲルの量を調整します。
● DNA が変性した。電気泳動の前に加熱しないでください。 20 mM NaCl を含むバッファーで DNA を希釈します。
● DNA鎖が巨大なため、従来のゲル電気泳動は適していません。パルスゲル電気泳動で分析します。アガロースゲル電気泳動に関して他にどのような問題がありましたか?今後、ガイドについてさらに研究していきます。
北京 Liuyi Biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) は、中国の電気泳動関連製品に焦点を当てた専門会社です。その物語は、中国がまだ改革開放の時期に入っていなかった1970年に始まります。 Liuyi Bitotech は長年の開発を通じて独自のブランドを持ち、電気泳動製品の国内市場では Liuyi ブランドとして知られています。
Liuyiブランドは中国で50年以上の歴史があり、安定した高品質の製品を世界中に提供できます。長年の開発を通じて、あなたの選択に値します。
Liuyi Biotech の横型電気泳動セル (タンク/チャンバー) は高品質で外観も良好です。さまざまなサイズのゲルトレイを使用すると、さまざまな実験要件を満たすことができます。私たちは独自の技術チームと工場を持っています。設計から製造、原材料から主要部品に至るまで、プロセス全体を管理できます。 DYCP 31シリーズはDNA電気泳動用のモデルです。DYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN、 そしてDYCP-31E。それらの違いはジェルのサイズと価格です。私たちはお客様にフルサイズの製品を提供します。モデルDYCP-32C最大のゲル250mm*250mmを作ることができます。
一方、当社の電気泳動電源を推奨します。DYY-6C、DYY-6DそしてDYY-10C当社電気泳動セル（タンク/チャンバー）DYCP-31および32シリーズ用。
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投稿時間: 2022 年 5 月 9 日